非变性质谱分析:技术原理、优势与应用-蛋白相关服务 -技术服务-生物在线
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非变性质谱分析:技术原理、优势与应用

非变性质谱分析:技术原理、优势与应用

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产品名称: 非变性质谱分析:技术原理、优势与应用

英文名称: Native Mass Spectrometry: Principles, Advantages, and Applications

产品编号: native-ms-zh1

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产品产地: 中国北京

品牌商标: 百泰派克生物科技

更新时间: 2025-04-15T09:31:38

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非变性质谱分析(Native MS)作为一种新兴的质谱分析手段,能够直接分析完整的蛋白质分子,并揭示其天然结构和翻译后修饰,在蛋白质组学研究中发挥着越来越重要的作用。下面我们将探讨其技术原理、在蛋白质组学中的优势及应用领域。

 

一、技术原理

质谱分析的基本原理是将样品离子化,通过质谱仪检测其质量/电荷比(m/z),从而实现分子鉴定与定量。

1、传统质谱与非变性质谱的区别

 

**传统质谱(Bottom-up)** **非变性质谱(Native MS)**  
     
样品处理 需酶切为肽段 直接分析完整蛋白
信息保留 可能丢失修饰与结构信息 保留天然构象、修饰及复合物状态
适用场景 高通量蛋白鉴定与定量 结构解析、相互作用研究

 

2、技术实现方式

(1)低能量离子化:采用电喷雾离子化(ESI)等温和方式,避免破坏蛋白质的非共价相互作用(如氢键、疏水作用)。

(2)高分辨率质谱仪:如Orbitrap、FT-ICR,精确测定大分子质量(可达MDa级)。

 

二、优势

1、保留蛋白质的天然结构和修饰

传统的酶切质谱分析依赖于将蛋白质切割成小肽段,而这些切割往往会导致修饰信息的丢失。非变性质谱分析则直接分析未经过酶切的完整蛋白质,因此能够更好地保持其天然的三维结构和翻译后修饰。对于如磷酸化、乙酰化、糖基化等修饰,Native MS 可以更加全面、准确地进行检测和定量。

 

2、提高复杂样品的分析能力

在复杂样品中,传统的酶切方法可能因某些蛋白质的低丰度或修饰不完全被检测到。而非变性质谱分析通过避免酶切步骤,能够直接检测和分析复杂的蛋白质组,尤其适用于含有多个修饰或具有高异质性的蛋白质。这样,研究人员可以获得更为完整的蛋白质信息,特别是关于全长蛋白的特征。

 

3、分析蛋白质-蛋白质相互作用

蛋白质间的相互作用对于细胞功能和生命活动至关重要。非变性质谱分析可以保留蛋白质间相互作用的非共价结合状态,有助于研究这些相互作用的具体机制。通过质谱分析,研究者能够同时检测到复合物中的多个蛋白质成分,为研究蛋白质-蛋白质相互作用网络提供了有力的工具。

 

4、高分辨率分析

非变性质谱分析通常需要高分辨率质谱仪和精准的分析技术。通过高分辨率的质谱数据,研究人员能够获得更为详细的蛋白质分子信息,尤其是在分析大分子蛋白质和复杂修饰时,能够有效区分细微的差异。这使得Native MS 在大规模蛋白质组学分析和精准医学中的应用具有优势。

 

三、应用

1、翻译后修饰的分析

翻译后修饰(PTMs)是蛋白质功能调控的机制,涉及磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化等多种修饰形式。传统的酶切质谱方法可能无法完全捕捉到复杂的修饰模式,而非变性质谱分析由于不依赖酶切,能够更好地保留修饰信息。特别是在磷酸化、乙酰化等修饰的检测中,非变性质谱提供了更高的准确性与可靠性,有助于深入理解细胞内的信号转导和代谢调控过程。

 

2、蛋白质-蛋白质相互作用的研究

蛋白质-蛋白质相互作用在细胞功能、信号传递及疾病发生中扮演着重要角色。传统的酶切质谱技术往往难以全面捕捉到蛋白质复合物的组成和结合模式,而非变性质谱分析能够直接分析完整的蛋白质复合物,从而揭示蛋白质间的相互作用,尤其是非共价相互作用。这有助于研究生物过程中的蛋白质相互作用网络、疾病标志物的筛选以及药物靶点的发现。

 

3、肿瘤和其他疾病的生物标志物发现

蛋白质组学是疾病早期诊断和治疗策略制定的工具。Native MS 通过全蛋白质分子的检测,有助于发现与疾病相关的翻译后修饰或结构变化,这些变化往往是疾病早期的信号。在癌症研究中,非变性质谱分析能够揭示肿瘤细胞中蛋白质的修饰和变异,帮助发现潜在的生物标志物,用于早期诊断或作为个性化治疗的靶点。

 

4、生物大分子药物的开发与研究

生物大分子药物(如单克隆抗体、疫苗等)在近年来取得了显著进展,非变性质谱分析能够帮助研究人员详细了解这些分子的构象变化、修饰情况及稳定性。对于生物制剂的研发,它提供了有效的工具来保证药物的质量和效果,尤其是在药物开发初期的结构鉴定和优化过程中。

 

通过直接分析蛋白质的整体结构和翻译后修饰,非变性质谱分析能够为研究蛋白质功能、相互作用、修饰及其在疾病中的变化提供更加精准的信息。百泰派克依托高分辨质谱平台,提供精准的非变性质谱(Native MS)蛋白鉴定服务,为您的科研项目提供有利的支持。

 

百泰派克生物科技特色项目

 

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对蛋白质的氨基酸组成分析,N端测序,C端测序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质,提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务,对蛋白序列进行分析。

 

※服务优势:

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;

6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

 

 

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

 

※服务优势:

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;

5.专业生物信息学分析,分析更系统准确。

 

 

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

 

※服务优势:

1.技术先进,填补技术空白

采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大,成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

 

 

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。

 

 

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

 

 

百泰派克生物科技七大检测平台

 

 

 

百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;

2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;

4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;

5.服务3000+企业,10000+客户的选择;

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

 

 

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