文章源自徕卡
前言：制备高质量的病理切片需要一定的技巧和经验—但我们都须从头开始学习。
该教程的目的是协助初学者熟悉石蜡切片的制备，以及作为经验更丰富的技术专家的进修课程。涵盖轮转式切片机制备石蜡切片的设置和操作相关的基本内容。同时对切片过程中的部分常见故障进行具体说明，并提供故障排除建议。
01 正确固定标本
固定是组织学标本制备技术中最重要的一步。即使在对组织标本进行处理和切片的过程中做到了很细致,但只有当组织被及时且充分固定时，才能显示出组织基本形态的细节。
1）通常情况下,相比于固定良好的标本,未进行良好固定的标本在切片时可能存在问题。
2）对于未能良好固定的组织,即使采用最优化处理方法并仔细切片,还是有可能得到质量较差的形态学结果。
02 正确处理组织
采用适当的方法对已良好固定的标本进行合理的处理,才能获得良好的组织切片。
1）标本处理不足(标本太大、处理时间过短)或处理过度(对于标本的大小和性质而言,处理的时间过长)。这两种情况均可能导致难以切片或者不能切片。
2）目前有多种技术可用于从问题蜡块中获取切片
3）如果蜡块因组织较硬或易碎而难以进行切片,可将其暴露面浸于冷水或柔软剂(弱洗涤剂溶液、织物柔软剂或 Mollifex)中。
4)对于含钙标本,将表面脱钙剂应用于暴露组织10分钟或更长时间)可以获得几张切片。在将蜡块置入切片机标本架之前应对蜡块进行良好漂洗和再切片,因为即使痕量的脱钙剂亦将损坏刀片架的压盘。
5)推荐采用石蜡胶带-传输系统从困难蜡块(固定、处理或浸润错误)获取切片,因为正常的切片方法不能成功获得切片。
6)如果在处理过程中第一时间末对标本进行充分处理,而导致不能从蜡块中获取切片,那么可以对标本进行再处理。
该胰腺蜡块未进行充分固定，因此根据固定时间不够的处理方案进行再处理。该图所示为处理不足的典型案例，即导致标本在周围石蜡中出现相当大的收缩。组织柔软且呈糊状因此不能进行切片，需要进行再处理。
03 仔细包埋标本
嵌入是非常重要的一步,需要一个成熟的方案。包埋不细致可能导切片更加困难。
1)避免包埋盒填充不足，因为这可能导致切片机夹持不稳定，从而导致切片“厚薄不均”等现象。
2)避免过度填充包埋盒，因为其可影响蜡块切面的正确对齐。
3)在夹持之前，应去除包埋盒之外存在的多余石蜡，以确保蜡块在切片过程中的稳定性。
4)标本的定位非常重要。
填充不足(左)、填充过度(右)以及包埋盒正确填充(中)示意图。包埋盒填充不足和填充过度均可导致切片过程中出现问题。
04 正确定位切片机
实验室中切片机的位置非常重要。
1)将切片机置于稳定工作台上,并且应远离通风口、门口和员工通道。来自空调的任何空气流动或其他原因均可导致切片操作非常困难。
2)首选高度可调的工作台以及符合人体工程学的椅子。
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